1、细胞简介
小鼠关节软骨细胞分离自正常小鼠关节软骨组织，软骨细胞主要功能：（1）软骨是人身体中唯一不会发生癌变的组织。（2）骨骼在发育初期大部分是由软骨构成的。（3）软骨一般起到承重负荷，减少关节间骨骼摩擦等作用。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
2、储存条件
请于2-8℃保存，有效期6个月。
请在严格无菌环境下操作使用，打开后的试剂2-8℃保存。
3、注意事项：
实验要保证在严格无菌环境下进行。
避免重复使用吸头和试管，以避免交叉污染。
4、操作步骤：
a. 将小鼠乙醚麻醉，75%的酒精消毒表面，并在无菌条件下分离大腿腿骨，尽可能去除筋膜、肌肉和结缔组织；
b. 将从关节处分离出软骨组织，将其剪成小于1 mm3（尽可能的小）的组织块，吸取7ml左右①号试剂 小鼠关节软骨细胞组织洗液反复吹打清洗2-3次，静置5 min后，弃去上层液体及漂浮组织，将剩余组织移入15ml离心管中；
c. 往离心管中加5ml②号试剂 小鼠关节软骨细胞组织处理缓冲液同时加入③号试剂 小鼠关节软骨细胞组织解离液A 250ul，置入37℃的恒温摇床中，振荡消化15-20 min；
d. 4℃静置5 min；弃上清，加入5ml②号试剂小鼠关节软骨细胞组织处理缓冲液同时加入④号试剂 小鼠关节软骨细胞组织解离液B 500ul，置入37℃的恒温摇床中，振荡消化30～60min（显微镜下观察至大量单细胞呈现）；
e. ⑦号试剂 小鼠关节软骨细胞完全培养基使用前每瓶需加入⑤号试剂 小鼠关节软骨细胞成纤维抑制剂和⑥号试剂 小鼠关节软骨细胞生长因子各1管，混匀；
f. 加入混合好的⑦号试剂 小鼠关节软骨细胞完全培养基终止消化，反复吹打后依次通过200目滤网。收集滤液1500rpm 离心5min，弃上清，吸取5ml混合好的⑦号试剂 小鼠关节软骨细胞完全培养基重新悬浮细胞 转入T25方瓶，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
g. 培养24h后换用新鲜混合好的⑦号试剂 小鼠关节软骨细胞完全培养基继续培养。